Государственная фармакопея Республики Беларусь -
Скачать (прямая ссылка):
Правильность изучают на образцах (субстанции или готового лекарственного средства) с добавленным известным количеством примесей.
Если примеси или продукты разложения недоступны, применяют арбитражный метод (см. п. 2.2.). Если примеси неизвестны, то чувствительность их определения может быть принята равной чувствительности определения субстанции. В случае, если чувствительность определения субстанции и примеси существенно отличается, вводят коэффициент пересчета.
Должен быть указан конкретный способ нормирования содержания примесей, например, в массовых процентах, в процентах по отношению к площади пика главного компонента или др.
5.3. Представление данных. Правильность оценивают не менее чем для девяти определений для трех различных концентраций, охватывающих весь диапазон применения, т.е. три концентрации и три определения для каждой концентрации. Определения должны включать все стадии методики.
Правильность выражают в процентах найденного значения от введенного или как разность между средним и истинным значением с учетом соответствующих доверительных интервалов.
6. Точность. Валидационная характеристика «точность» изучается для методик количественного определения.
6.1. Сходимость. Сходимость изучают, выполняя:
— не менее девяти определений, охватывающих диапазон применения методики (три концентрации/три повтора) или
— не менее шести определений для образцов с содержанием анализируемого вещества, близким к номинальному.
6.2. Внутрилабораторная точность. Установливают влияние случайных факторов на точность валидируемой аналитической методики. Типичными исследуемыми факторами являются различные дни, различные аналитики, различное оборудование и т.п. При изучении влияния различных факторов предпочтительно использовать планирование эксперимента.
6.3. Воспроизводимость. Воспроизводимость оценивают путем проведения межлабо-раторных исследований. Воспроизводимость должна быть изучена при включении методики в Фармакопею.
6.4. Представление данных. При изучении точности должны представляться: стандартное отклонение, относительное стандартное отклонение и доверительный интервал.
7. Предел обнаружения
В зависимости от того, является ли методика инструментальной или не инструментальной, возможны различные подходы для определения предела обнаружения. Используются следующие подходы.
7.1. Визуальная оценка. Визуальную оценку используют как для не инструментальных, так и для инструментальных методов.
Предел обнаружения устанавливают путем анализа образцов с известными концентрациями анализируемого вещества и оценкой минимального содержания, при котором анализируемое вещество надежно определяется.
7.2. Соотношение Сигнал/Шум. Этот подход применим только к тем методам, для которых наблюдается шум базовой линии. Для определения соотношения сигнал/шум сравнивают величины сигналов, полученные для контрольного опыта и для образцов с низкими концентрациями анализируемого вещества. На основании полученных данных устанавливают минимальную концентрацию, для которой величина отношения сигнал/шум составляет обычно от трех до двух.
7.3. Использование калибровочной прямой и стандартного отклонения аналитического сигнала. Предел обнаружения (ПО) может быть выражен как:
МВ _ 3,3 х — (1)
' S
где:
5 - стандартное отклонение сигнала,
S - тангенс угла наклона калибровочной прямой.
Значение тангенса угла наклона калибровочной прямой вычисляют из калибровочной прямой для анализируемого вещества. Оценка стандартного отклонения сигнала может быть проведена многими способами, например следующими.
7.3.1. Использование стандартного отклонения сигнала для контрольного опыта. Измеряют величину аналитического сигнала для необходимого числа образцов, не содержащих анализируемое вещество, и вычисляют стандартное отклонение.
7.3.2. Использование калибровочной прямой. Получают калибровочную прямую для образцов с содержанием анализируемого вещества, близким к пределу обнаружения, и вычисляют ее параметры. В качестве стандартного отклонения S в формуле (1) может быть использовано стандартное отклонение свободного члена линейной зависимости.
7.4. Представление данных. Представляют значение предела обнаружения с указанием способа, использованного для его определения. Если определение предела обнаружения основывается на отношении сигнал/шум, представляют соответствующие хроматограмме/
Если значение предела обнаружения получено путем вычислений или экстраполяции, его оценка должна быть подтверждена анализом необходимого числа образцов с содержанием анализируемого вещества, близким к пределу обнаружения.
8. Предел количественного определения
Возможно несколько подходов для определения предела количественного определения, зависящих от того, является ли методика инструментальной или не инструментальной. Могут быть использованы следующие подходы.
